在分子生物学和生物医学研究中,电泳缓冲液的配制至关重要。以下是两种常用的电泳缓冲液的详细配方。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
为制备1L的50×Tris-乙酸缓冲液,各成分及用量如下:
- 2 mol/L Tris碱:242 g
- 1 mol/L 乙酸:571 ml 冰乙酸(174 mol/L)
- 100 mmol/L EDTA:200 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 补足至1L水
2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
为制备1L的5×Tris-硼/酸缓冲液,各成分及用量如下:
- 445 mmol/L Tris碱:54 g
- 445 mmol/L 硼酸盐:275 g
- 10 mmol/L EDTA:20 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 补足至1L水
3. 染料配制
在分子生物学研究中,常用的染料及其配制方法如下:
3.1 1%溴酚蓝
将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100 ml水中,搅拌或用涡旋混合直至完全溶解。
3.2 1%二甲/苯青FF
将1 g二甲/苯青FF溶解于适量水中,定容至100 ml。
3.3 10 mg/ml的溴化乙锭
小心称取1 g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。用铝箔包裹装液管,储存于4℃。
4. 凝胶上样液
根据实验需求,凝胶上样液的制备方法如下:
4.1 6×碱性凝胶上样液
配制10 ml的各成分用量如下:
- 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型):适量
- 0.15%溴甲酚绿
- 0.25%二甲/苯青FF
- 水:300 µl
- 10 N氢氧化钠:120 µl
- 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):18 g
- 补足至10 ml
5. 结语
通过上述配方的制备,可以为生物医学研究提供必要的实验条件。使用尊龙凯时的高质量实验试剂,确保实验的准确性与可靠性。